产品编号:PC0391
英文名:Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
产品简介
台盼蓝(Trypan blue)又锥蓝或锥虫等,分子式为C34H24N6NA4O14S4,分子量为960.81,CAS Nunber72-57-1,是一种阴离子型染料。这种染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透型增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色,是最常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速的区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。
台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒( Trypan Blue Staining Cell Viability Assay Kit)是一款简易的细胞存活率检测试剂盒,含实验所需的台盼蓝染色液和细胞重悬液。操作简单快捷。
存储条件:4℃保存,一年有效。【注】如有沉淀,放置37℃水浴锅后使用。
自备材料
1、PBS
2、胰蛋白酶消化液
2、细胞计数板
3、光学显微镜
操作步骤(仅供参考)
1、收集细胞:
如果收集贴壁细胞,应用胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞,收集细胞。如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000~2000g离心1min,弃上清,用1mlPBS重新悬浮起细胞沉淀。
2、台盼蓝染色:
吸取100ul重悬的细胞常规1.5ml和0.5ml离心管内,加入100ul Trypan blue Stain(0.4%)轻轻混匀,染色3min(染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。
3、细胞计数:
吸取少量染色细胞到血球计数板内,于普通光镜10x物镜下计数四个大格内的细胞数,压线者数上不数下,数左不数右,分别记录着色细胞(包括损伤细胞和死细胞)
和未著色细胞(活细胞)。
[注] : 用移液枪加样,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不宜过量或量太少。
[注] : 每个细胞样品至少需数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率计算公式如下:
细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数*100%
[注意] : 处于健康的对数生长期细胞,通常情况活细胞至少占到95%。
注意事项
1)Trypan blue stain对人体有轻微毒性,请注意小心防护。
2)试剂是无菌的使用时最好在超净台内进行无菌操作,避免细菌污染。
3)注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 象形图 | |
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| 警示语 | |
| Class | |
| 警告说明 | |
| UNub | |
| 危险声明 | |
| Packing Group |