产品编号：KEM0125
英文名：Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, （Quick CIP）
快速 CIP 是重组表达的热敏小牛肠碱性磷酸酶（CIP）。快速CIP可非特异性催化DNA和RNA的 5′ 和 3′ 末端磷酸单酯的去磷酸化。另外，还水解核糖核苷酸和脱氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。快速CIP可用于各种 DNA 或 RNA 末端去磷酸化的实验。在克隆中，对线性化质粒 DNA 去磷酸化，可防止自连。该酶可以快速作用于5′突出端、5′ 凹陷端和平末端，反应时间仅需10分钟。快速CIP也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP，用于制备测序模板和 SNP分析。与不可热失活的野生型CIP相比，快速CIP 80℃加热 2 分钟即可完全且不可逆地失活。因此在连接或末端标记前无需去除快速CIP。
小牛肠碱性磷酸酶基因克隆自小牛肠粘膜并在毕赤酵母（Pichia pastoris）中表达。
1 单位是指在 1 ml 反应体系中，37℃ 条件下，1 分钟内水解 1 μmol 对硝基苯磷酸盐（PNPP）所需的酶量。
1X 反应缓冲液
Incubate at 37°C
1X 反应缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 25°C)
25 mM Tris-HCl
1 mM MgCl2
0.1 mM ZnCl2
50% Glycerol
pH 7.5 25°C
80°C for 2 minutes
1 M 二乙醇胺-HCl（pH 9.8）、0.5 mM MgCl2、50 mM 对硝基苯磷酸盐。这些条件仅用于定量酶活性。
应用特性
1 快速且不可逆的热失活特性，节省纯化步骤
2 贮存稳定性优于野生型酶
3 快速建立反应（无需锌等额外添加剂）并缩短温育时间
4 反应条件灵活（兼容任何限制性内切酶缓冲液，无需纯化）
5 所需酶量更少（活性更高），从而降低每次反应的成本
6 无需多种磷酸酶（快速 CIP 可以从 DNA、RNA 和 dNTPs 中去除 5′ 和 3′ 磷酸基）
7 降解 PCR 产物中未掺入的 dNTP，提高 DNA 测序和 SNP 分析质量
8 重组酶保证纯度、批间一致性和更高性价比
9 DNA 和 RNA 的 5′ 与 3′ 末端的去磷酸化。
10 克隆载体 DNA 去磷酸化，防止载体自连。
11 在使用 T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）标记末端前对 DNA 进行去磷酸化。
12 在测序或 SNP 分析前去除 PCR 反应中的 dNTP。
注意事项
快速 CIP 与大多数碱性磷酸酶一样，是一种 Zn2+ 和 Mg2+ 依赖型酶。在我们的制剂中，锌原子被紧密结合在活性中心，因此无需补充锌或其它添加剂。
单价盐可提高快速 CIP 的活性。
金属螯合剂（如 EDTA）、无机磷酸盐和磷酸盐类似物会抑制快速 CIP。
存在还原剂（DTT、β-巯基乙醇）时快速 CIP 活性降低。
快速 CIP 是同源二聚体。单体分子量为 56 kDa。
| 象形图 | |
|---|---|
| 警示语 | |
| Class | |
| 警告说明 | |
| UNub | |
| 危险声明 | |
| Packing Group |
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