来源:
来自加拿大不列颠哥伦比亚大学卵巢组织库,SV40 转化的细胞系,转化子:
NCBI_TaxID:1891767。细胞倍增时间约 26 小时。
T25 细胞到货处理
观察:收到细胞后,请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液等异常情况。
处理:
1)75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。
2)显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40x,100x,200x 各一张)前三天照片为重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。
3)不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37 度培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。
4)收到细胞后,及时查看说明书是贴壁细胞还是悬浮细胞形态,并按常规贴壁或悬浮细胞的传代方法操作。
贴壁:未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过 80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。首次传代,建议 1:2 传代(两个 T25)。(传代时建议一瓶用原瓶里面的完全培养 基,另外一瓶用自己配的完全培养基,进行对比培养。)
备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。当密度达到80%左右, 传代比例前几次都按照1:2传代,传代后一个倍增周期后可以长成2瓶80%左右密度的细胞时,冻存其中一瓶成1个1ml的冻存管当种子细胞保存,另外一份长满的细胞继续1:2传代,反复操作后冻存细胞种子大约3个以上。 后续根据细胞倍增效率和密度可以适当扩大传代比例做实验。
传代比例:
1个T25瓶传2个6cm的培养皿或者2个T25瓶 相当于1:2
1个T25瓶传1个10cm的培养皿或者1个T75瓶 相当于1:3
注意事项:
本产品仅限科研用途
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危险声明 | |
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