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PicoGreen

PicoGreen基本信息

产品编号:PD1005

英文名:PicoGreen

  • 运输条件:-20℃

PicoGreenSKU信息

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PD1005-100ul 100ul ¥480.00
¥480.00
30
PD1005-500ul 500ul ¥1580.00
¥1580.00
3
PD1005-1ML 1ml ¥1980.00
¥1980.00
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PicoGreen产品详情

简介:

PicoGreen是一种特异性结合双链DNA dsDNA) 的饱和荧光染料,激发波长为480 nm,发射波长为520 nm,与大多数荧光计和荧光酶标仪兼容。PicoGreen仅与dsDNA结合后才发出荧光,不受核苷酸和单链核酸的影响,产生的荧光强度与dsDNA浓度成正比,且无序列依赖性,非常适合于dsDNA的定量检测,可检出25 pg/ml~1 μg/ml浓度范围内的dsDNA。PicoGree有以下优势:1 灵敏度高:可检测低至200 pg的dsDNA,节省宝贵样品;2 特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;3 耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。4 易于使用——只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于96和384孔板;与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。5 适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

参考操作:

一.染料工作液的配置 PicoGreen dsDNA定量试剂取出后回温至室温,该试剂是以100 µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的。实验当天,根据实验用量用1×TE(10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 7.5)按1:200 的比例稀释PicoGreen浓缩液。 注意事项

1 由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。

2 PicoGreen试剂见光易降解,所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。

3 溶液最好在配制好数小时内使用,以保证最佳结果。

二.标准品工作液的配制 取λDNA标准品,用无菌TE buffer配制成100 μg/mL的标准品工作液。

注意事项:标准品也可用其他已知浓度的纯化DNA;有一些产品描述可使用小牛胸腺DNA作为标准品,按照我们实际操作经验,并不推荐它作为标准品。  

三.标准品工作液稀释

1 母液稀释:使用TE缓冲液将100 μg/mL的标准品稀释为2 μg/mL。

2 梯度稀释:参照表1,对DNA标品母液进行梯度稀释。 表1 标曲制作 TE体积(μL) 2 μg∕mL DNA标准品母液(μL) Picogreen染料工作液(μL) DNA标准品终浓度 0 1,000 1,000 1 μg/mL 900 100 1,000 100 ng/mL 990 10 1,000 10 ng/mL 999 1 1,000 1 ng/mL 1,000 0 1,000 Blank  

3 标准曲线的制备:向经稀释的各梯度标准品溶液中加入1 mL染料工作液混匀,避光室温孵育5 min。使用酶标仪或荧光计检测荧光强度(Ex=480 nm,Em=520 nm);将溶液加入比色皿或取200 μL加入微孔板,确信不要在样品中引入气泡;以1×TE缓冲液空白对照,测定标准品荧光值;用标准品溶液的浓度(ng/mL)对应的荧光强度作直线回归,制备标准曲线。

4 测量剩余样品的荧光值:荧光计将给出一个直接的浓度读数,数据可以用来产生DNA浓度的标准曲线。

TE体积(μL 2 μg∕mL DNA标准品母液(μL Picogreen染料工作液(μL DNA标准品终浓度
0 1,000 1,000 1 μg/mL
900 100 1,000 100 ng/mL
990 10 1,000 10 ng/mL
999 1 1,000 1 ng/mL
1,000 0 1,000 Blank

 

注意事项:

为了您的健康,请佩戴一次性手套。

本产品仅限科研用途。

PicoGreen安全信息

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警示语
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