简介:
Lentivirus Precipitation Solution(慢病毒浓缩液)是一种简单、快速、高效的慢病毒浓缩试剂,能够对所有类型的慢病毒颗粒进行简单且有效的富集。该试剂操作简便,仅需将慢病毒原液和5×慢病毒浓缩液按比例混合,孵育一定时间,即可用普通高速离心机离心富集,得到浓缩的慢病毒颗粒,回收率可达90%以上,提高100倍病毒滴度。
使用说明:
1.收集慢病毒上清液,于4℃,4000 g 离心20min,去除细胞碎片;
2.上清转移至新的离心管中,于4℃,12000 g 离心30min,去除细胞中的杂蛋白;(或将收集的慢病毒上清液采用 0.45 μm滤膜的无菌滤器过滤除去细胞碎片,如果使用滤膜过滤,只能使用低蛋白结合力的纤维素醋酸酯或聚醚砜膜,不能用硝酸纤维素膜,在过病毒原液之前,滤膜可用3-5 mL预冷PBS提前过一次);
3.上清转移至新的离心管中,将慢病毒上清液与5x慢病毒沉淀浓缩液按4:1(病毒上清液4份,病毒浓缩液1份)的比例颠倒混匀,每30min混合一次,共进行3-5次,置于4℃孵育过夜(适当延长孵化时间可以提高病毒回收率)
4.过夜孵育的混合液,于4℃,4000 g 离心,20min。
5.小心去除上清,用原体积1/10~1/100 的 DMEM 或 PBS 重悬慢病毒颗粒(部分情况下,沉淀物不一定肉眼可见),轻轻吹打均匀,重悬沉淀物后,可以测定浓缩慢病毒样品的滴度后根据实验使用量分装并置于-80℃保存(尽量减少慢病毒反复冻融的次数,以免降低病毒滴度)。
注意事项:
本产品仅限科研用途。
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| 危险声明 | |
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